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影響生乳中懷孕相關醣蛋白檢測值的三大要素
楊明桂、凃柏安、李佳馨、王思涵
在國外，部分偏遠地區的酪農戶，由於獸醫師人力資源有限，無法立即進行懷孕診斷，往往需要等到配種後60至80天才能知道妊娠檢查之結果，造成場內繁殖效率低落。這些乳牛場為改善場內繁殖效率，開始尋求一種非侵入性的方式進行妊娠檢查，既可以得知牛隻是否有懷孕，亦不會增加現場作業上之過多麻煩，這方式即為生乳懷孕檢測。
生乳懷孕檢測主要是檢測乳中懷孕相關物質之濃度，早期是以檢測生乳中助孕酮（Progesterone）濃度來判定母牛是否懷孕，這方法具有快速、簡便及懷孕牛檢測出之準確性高及在現場即可得知結果等優點，然而，其對未懷孕牛檢測之準確性卻較低，有部分是因未懷孕牛卵巢囊腫或黃體持久不消，導致助孕酮濃度飆高，而非真正的懷孕。
近年來，IDEXX 實驗室開發出生乳檢測懷孕相關醣蛋白（Pregnancy-
associated glycoprotein, PAG）之商業套組。PAG是一大型不活化的天門冬胺酸蛋白質族群，主要是由反芻動物(牛、羊及鹿等)胚之滋胚層（trophoblast）單核或雙核細胞所分泌，其半衰期約7至10天。Ricci等（2015）研究報告指出影響生乳中PAG檢測值為人工授精後天數、胎次及乳量，分述如下：
人工授精後天數
在正常懷孕母牛，人工授精後天數是主要影響商業套組檢測值之原因。從圖1上方之曲線圖可發現在人工授精後25天至32天左右懷孕蛋白檢測值是呈現上升，然而在39天至67天卻是呈現下降，74天至102天又呈現上升之趨勢，PAG檢測值上升或下降實際機制目前還不明瞭，目前只知道與配種後天數呈現曲線關係。另外，圖2顯示正常懷孕牛在配種後25-102天利用生乳PAG檢測套組正確檢測出懷孕之機率，可發現配種後32、88、95及102天可被檢測出懷孕之機率較高（如圖中空白長條），其餘之天數或有偽陽性之狀況產生，因此建議在懷孕32至39天或74天之後送檢較為準確。
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圖1.
懷孕母牛生乳PAG檢測值與人工授精後天數
之關聯性。虛線表示PAG閾值，虛線以上表
示懷孕；點狀線為下限值，點狀線以下為未
孕，虛線與點狀線之間為疑似。 |
圖2.
從懷孕母牛生乳檢驗出懷孕之比例與人工
授精後天數之關聯性。空白長條表示懷孕，
斜線長條表示疑似，實心長條表示未懷孕。 |
胎次
母牛胎次會影響PAG濃度。圖3可發現第2胎次懷孕母牛的生乳中PAG濃度（實心曲線）較經產（懷3胎以上者）母牛高。此外，從圖3及圖4可發現，懷第2胎次母牛被驗出疑似（斜線長條）或未懷孕者（實心長條）比例也較經產母牛少，實際原因尚待進一步研究。
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圖3.
不同產次懷孕母牛生乳PAG檢測值與人工授精
後天數之關聯性。實心曲線為第2胎次懷孕母
牛，空心曲線為經產懷孕母牛。虛線表 示
PAG閥值，虛線以上表示懷孕；點狀線為下限
值，點狀線以下為未孕，虛線與點狀線之間
為疑似。 |
圖4. 從第2胎次懷孕母牛生乳檢驗出懷孕之比例
與人工授精後天數之關聯性。空白長條表
示懷孕，斜線長條表示疑似，實心長條表
示未懷孕。 |
圖5.
從經產懷孕母牛生乳檢驗出懷孕之比例與人工
授精後天數之關聯性。空白長條表示懷孕，斜
線長條表示疑似，實心長條表示未懷孕。 |
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圖6. 第2胎次懷孕母牛生乳中PAG濃度與乳產量之關聯性。 |
圖7.
經產懷孕母牛生乳中PAG濃度與乳產量之關聯性。 |
乳量
研究顯示人工授精後，乳量較高的懷孕牛，體內助孕酮濃度較低，主因肝臟代謝助孕素之效率增加，並導致胚發育較慢，而PAG是由滋胚層所分泌，胚發育較慢之結果使得PAG產量減少。此現象無論在第2胎次懷孕母牛（圖6）或經產（懷2胎以上者）懷孕母牛（圖7）皆可發現。
綜上所述，使用生乳中之PAG來測孕，是一種非侵入式的測孕方式，不像傳統超音波或直腸觸診，容易對乳牛造成緊迫。檢測生乳中PAG濃度可確實檢驗出乳牛是否懷孕，主因PAG是由胚滋胚層所分泌，而非母牛本身。然而其檢測值會受到人工授精後天數、胎次及乳量等影響，在繪製標準曲線圖時需考慮到上述因素，期望在繪製母牛完整懷孕期PAG標準曲線後，能推算出配種日期及分娩日期，解決乳牛場內某些乳牛配種日或分娩日不明之問題。
參考文獻：
Ricci, A., P. D. Carvalho, M. C. Amundson, R. H.
Fourdraine, L. Vincenti, and P. M. Fricke. Factors associated with
pregnancy-associated glycoprotein (PAG) levels in plasma and milk of
Holstein cows during early pregnancy and their effect on the accuracy of
pregnancy diagnosis. 2015. J. Dairy Sci. 98 :2502–2514.
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