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磺胺劑的簡易層析檢驗法

台糖埔里食品部　王振國

　　磺胺劑檢驗項目以磺胺二甲嘧啶(SMT)和磺胺二甲氧嘧啶(SDM)兩項為主，是一種定性檢驗試劑。檢驗時是同步檢測兩種磺胺劑的濃度，濃度若超過0.01ppm，則視為有磺胺劑殘留問題。

一、	檢驗材料：
1.	微量測試孔盤(F16 microtiter well)：
	每個孔盤有8*2的孔洞，每組試劑提供6個孔盤。
2.	定性測試乳膠-抗體結合體溶液：(儲存於4℃)
	★磺胺二甲嘧啶(SMT)乳膠-抗體結合體溶液
	★磺胺二甲氧嘧啶(SDM)乳膠-抗體結合體溶液
3.	SMT與SDM的簡易層析測試片：(儲存於4℃)
4.	凍乾標準品(儲存於4℃)：
	★磺胺二甲嘧啶(SMT)標準品對照樣本
	★磺胺二甲氧嘧啶(SDM)標準品對照樣本
5.	小吸管
6.	稀釋液

二、	(可同時定性測試7個乳樣)操作步驟
1.	使用前先將整組試劑(乳膠-抗體結合體溶液及簡易層析測試片及凍乾標準品)拿至室溫中回溫30分鐘。
2.	將凍乾之磺胺二甲嘧啶(SMT)標準品對照樣本及凍乾之磺胺二甲氧嘧啶(SDM)標準品對照樣本，每瓶各分別加入1ml之稀釋液溶解。
3.	取出F16 2*8微量測試孔盤。擺放成直狀，即左右側各有8個孔洞的方式。左側是SMT檢驗用，而右側是SDM檢驗用。
4.	以小吸管各分別加入一滴磺胺二甲嘧啶(SMT)乳膠-抗體結合體溶液於F16左側微量測試孔(計8孔)中，再以小吸管各分別加入一滴磺胺二甲氧嘧啶(SDM)孔膠-抗體結合體溶液於F16右側微量測試孔(計8孔)中。
5.	最上方的孔洞，於左側微量測孔中以小吸管滴入一滴的磺胺二甲嘧啶(SMT)標準對照樣，再於右側微量測試孔中以小吸管滴入一滴的磺胺二甲氧嘧啶(SDM)標準品對照樣本。
6.	孔盤的第2至第8排孔洞，同來檢測乳樣用。每個待測牛奶樣，分別以小吸管加入一滴於同一排的左、右微量測試孔中，加入7個測牛奶樣品後，手要輕輕以半握住Ｆ16的方式，貼著桌面震盪使孔洞內的液體均勻混合約30秒。
7.	於每個測試孔中放入一片有磺胺二甲嘧啶(SMT)與磺胺二甲氧嘧啶(SDM)檢驗功能的簡易層析測試片(有貼紅色標籤紙在上端)，全部放入後，開始計時。
8.	二分鐘後判讀結果(判讀結果時間不超過10分鐘)。
三、	結果判定：
(一)	磺胺二甲嘧啶(SMT)判定(看左側的孔盤)
1.	標準品測試片出現之反應
	左側磺胺二甲嘧啶(SMT)標準品對照樣本所測測試片出現之反應為：測試片上半部為一條清楚藍線，測試片下半部為一條淡藍線。下半部淡藍線淡於上半部清楚藍線。
2.	待測牛奶樣品反應之判讀
	讀左側待測牛奶樣品測試片時，下半部出現線的深淺和SMT標準品對照樣本測試片下半部之淡藍線相比：
	★在左側待測牛奶樣品測試片下半部上出現線的顏色的深淺深於SMT標準品對照樣本測試片下半部之
	淡藍線則判為陰性反應；即磺胺二甲嘧啶(SMT)濃度小於0.01ppm，無磺胺劑殘留。
	★在左側待測牛奶樣品測試片下半部上出現線的顏色的深淺淡於SMT標準品對照樣本測試片下部之淡藍線或看不到任何線，則判為陽性反應；即磺胺二甲嘧啶(SMT)濃度大於0.01ppm，有磺胺劑殘留。
(二)	磺胺二甲氧嘧啶(SDM)判別(看右側的孔盤)
1.	標準品測試片出現之反應
	右側磺胺二甲氧嘧啶(SDM)標準品對照樣本所測測試片出現之反應為測試片上半部為一條清楚紅線，測試片下半部為一條淡紅線。下半部淡紅線淡於上半部清楚紅線。
2.	測牛奶樣品反應之判讀
	讀右側待測牛奶樣品測試片時，下半部上出現線的深淺和SDM標準品對照樣本測試片下半部之淡紅線相比
	★右側待測牛奶樣品測試片下半部之淡紅線的顏色的深淺深於標準品對照樣本測試片下半部之淡紅線，則為陰性反應，即二甲氧嘧啶(SDM)濃度小於0.01ppm。
	在右側待測牛奶樣品測試片下半部上出現線的顏色的深淺淡於標準品對照樣本測試片下半部之淡紅線或看不到任何線，則為陽性反應；即二甲氧嘧啶(SDM)濃度大於0.01ppm，有磺胺劑殘留。
四、	試劑之保存
1.	試劑保存於4℃冰箱。
2.	已拆封之簡易層析測試片須於當日用完。
3.	未使用完之乳膠-抗體結合體溶液及凍乾標準品，可放回4℃冰箱下次再用。
4.	未使用過之微量測試孔孔洞，隔次仍可使用。
五、	生乳送檢時注意事項
1.	本試劑適用於牛奶(生乳/鮮乳)檢體，而煮沸過之牛奶，其測試結果亦不受影響。
2.	乳樣須冷藏在2-5℃。並且在3天內檢驗完畢。

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