保存細胞：山羊精子(Sperm of Goat)

公山羊

製作儀器

圖A.公羊採精用器具

a.電器採精器主機：可充電式，手動調節電刺激強度。
b.電極：含三條電極線，插入直腸中，使電極位於公羊副性腺之上方。
c.潤滑劑：潤滑電極棒用。
d.精液接收器。
e.精液接收用試管及保溫試管。

圖B.公羊冷凍精液製作器具

a.精液麥管降溫用保溫箱：箱內倒液態氮，利用液氮蒸氣逐漸將精液冷凍。
b.精液貯存桶：灌充液氮，做為生殖細胞長期保存之用。
c.注射筒連接麥管：吸取經稀釋平衡完成之精液，完成精液充填手續。
d.麥管封口用粉末。
e.麥管架：平放經充填完成之精液，準備放入液氮蒸氣中(a)進行冷凍。

公羊冷凍精液製作方法：

• 1.稀釋液之配製：
  • A 溶液（不含甘油） ─ 154ml 2.9％ 枸緣酸鈉溶液 ＋ 40ml 蛋黃。
  • B 溶液（含 甘 油） ─ 132ml 2.9％ 枸緣酸鈉溶液 ＋ 40ml 蛋黃 ＋ 28ml 甘油。
• 2.步驟：

┌──┐
│採精│
└──┘
以假陰道或電氣採精器進行
採精前需清潔陰莖鞘周圍穢物


圖C.公羊以電氣採精之情形

↓

  精液添加抗生素
┌──┐
│鏡檢│
└──┘
包括精液量、顏色、精子濃度、活力及畸形率等
檢查活力過程中在 37℃ 保溫器上進行

圖D.精子之活力檢查
↓

計算稀釋倍數
┌──┐
│稀釋│
└──┘
1）以總稀釋量 1/2 之 A 液與原精液，緩慢進行
稀釋，再於 4℃ 平衡 2 小時以上。
2）A 液平衡後，再與總稀釋量 1/2 之 B 液緩慢
進行稀釋，於 4℃ 平衡約 4 小時左右。

↓
┌──┐
│充填│
└──┘
利用注射筒連接麥管吸取約 0.5ml 精液，
再以麥管封口粉末進行封口後放入冰水中。
取出麥管並予拭乾
┌──┐
│冷凍│
└──┘
↓
1）將麥管平放於麥管架上。
2）將麥管架逐漸放入液氮蒸氣中，緩慢進行冷凍
最後將麥管倒入液態氮中。
3）冷凍完成之麥管，存放於液態氮桶中，長期保存。

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